مجموعة من الكواشف "وسط غذائي لعزل المكورات البنية الجافة" (GNK agar). GVG - بيئة المكورات البنية. وسط غذائي لعزل وزراعة النيسرية البنية الجافة لعزل المكورات البنية
سعر: تحت الطلب
يمكنك إضافة عنصر إلى عربة التسوق الخاصة بك عن طريق تحديد الكمية
المكورات البنية هي على شكل حبة ، مرتبة على شكل مكورات ثنائية ، محاطة بكبسولة صغيرة ، لا تحتوي على سوط ، ولا تشكل جراثيم ، على غرار المكورات السحائية. يحتوي جدار الخلية على غشاء خارجي ، تنقسم البروتينات إلى ثلاث مجموعات حسب أهميتها الوظيفية. تتميز المكورات البنية بوجود الفلفل ، والتي تختلف عن بعضها البعض في خصائصها المستضدية (16 متغيرًا مستضديًا). تُزرع المكورات البنية على وسط غذائي يحتوي على بروتين أصلي (مصل الدم ، سائل استسقائي). تنمو بشكل أفضل عند 3-5٪ من ثاني أكسيد الكربون. على الأسكيتاجار يشكلون مستعمرات شفافة ذات حواف ناعمة. من الكربوهيدرات ، يتم تخمير الجلوكوز فقط ، ويتكون الكاتلاز وأوكسيديز السيتوكروم - إنزيمات نموذجية للنيسرية.المستضدات
التركيب المستضدي للمكورات البنية متغير. ويرجع ذلك إلى وجود العديد من المتغيرات المستضدية للفقرات ، والتي تتشكل أثناء تطور العدوى.الإمراضية والتسبب
ترتبط المكورات البنية بالظهارة الأسطوانية للإحليل ، والجزء المهبلي من عنق الرحم ، والمستقيم ، وملتحمة العين ، وكذلك الحيوانات المنوية والبروتوزوا (المشعرات ، الأميبا). يحدث الالتصاق بسبب الشعيرات والبروتينات الموجودة في الغشاء الخارجي لجدار الخلية. السمة المميزة للمكورات البنية هي قدرتها على اختراق الكريات البيض والتكاثر فيها. جزء السكاريد الدهني من جدار الخلية له تأثير سام. السكريات المحفظة تمنع البلعمة. بالتواصل مع الزغب من الظهارة الأسطوانية للغشاء المخاطي للإحليل ، وفي النساء وقناة باطن عنق الرحم ، تخترق المكورات البنية الخلايا بمشاركة بروتينات الغشاء الخارجي لجدار الخلية. هذا يؤدي إلى تطور التهاب الإحليل الحاد والتهاب عنق الرحم والآفات لدى النساء في عنق الرحم والملاحق (الأنابيب والمبايض) ، عند الرجال من الحويصلات المنوية ، البروستات. مع التوطين خارج التناسلية ، يمكن للمكورات البنية أن تلحق الضرر بالمستقيم واللوزتين ، وتسبب أيضًا مرض السيلان (التهاب الملتحمة) عند الأطفال حديثي الولادة. تحدث العدوى أثناء مرور قناة الولادة لأم مصابة بمرض السيلان.حصانة
في مرض السيلان ، هناك استجابة مناعية خلطية. ومع ذلك ، فإن الأجسام المضادة للبكتيريا الناتجة ليس لها خصائص وقائية. خلال مسار المرض ، يتم تشكيل IgA الذي يثبط ارتباط العامل الممرض بخلايا الغشاء المخاطي للإحليل. ومع ذلك ، فهم غير قادرين على حماية الغشاء المخاطي من العدوى اللاحقة بأجيال أخرى من المكورات البنية ، والتي ترتبط بتغيير في تركيبها المستضدي. هذا يؤدي إلى إعادة العدوى والانتكاسات ، وكذلك إلى انتقال المرض إلى شكل مزمن.التهابات المكورات البنية
ينتمي العامل المسبب لمرض السيلان ومرض السيلان النسيجي (وفقًا للتصنيف الأولي للمكورات البنية) إلى عائلة Neisseriaceae ، جنس Neisseria. في المسحات من إفرازات المرضى ، تتشكل المكورات البنية مثل حبوب البن ، سالبة الجرام ، مرتبة في أزواج داخل الكريات البيض (البلعمة غير الكاملة) وخارج الخلايا. وفقًا لخصائصها المورفولوجية ، فهي تشبه المكورات السحائية إلى حد كبير. بالنسبة للمكورات البنية ، فإن تعدد الأشكال متأصل - هناك خلايا صغيرة وكبيرة ، نادرًا ما تكون على شكل قضيب ، وهي غريبة الأطوار جدًا لوسائط المغذيات. ينمو بشكل أفضل على الوسائط التي تحتوي على الدم والمصل والسائل الاستسقائي. تحتوي المكورات البنية على مستضدات البروتين وعديد السكاريد ، والتي بموجبها يتم تقسيمها إلى 16 مصلًا ، ولكن لم يتم تحديدها بعد في المعامل البكتريولوجية الروتينية.للتشخيص الميكروبيولوجي للعدوى بالمكورات البنية ، يتم استخدام طرق الجراثيم والبكتريولوجيا والسيرولوجيا والحساسية.أخذ المواد للبحث
من أجل إجراء التشخيصات البكتريولوجية والبكتيرية بشكل مناسب وحميدة ، من المهم أن تأخذ المواد السريرية بشكل صحيح. كقاعدة عامة ، يجب أن يتم إجراؤها من قبل الطبيب. عند الرجال ، يتم فحص إفرازات مجرى البول ، والممرات المجاورة للإحليل ، والمستقيم ، إذا لزم الأمر ، والمواد من البلعوم الفموي ، وكذلك سر غدة البروستاتا بعد تدليكها. يمكنك أيضًا فحص رواسب و "خيوط" البول ، ولكن يتم اكتشاف المكورات البنية فيها بشكل أقل تكرارًا. قبل أخذ المواد من مجرى البول ، يجب على المريض عدم التبول لمدة 4-5 ساعات ، وعدم استخدام الأدوية المضادة للميكروبات والمحاليل المطهرة. يتم مسح الفتحة الخارجية للإحليل أولاً بقطعة قطن معقمة مبللة بمحلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.85٪ ، ثم بمسحة جافة. لا تُصنع المسحات من السماد ، فهي تتدفق بحرية ، ولكن من مادة مأخوذة عن طريق الكشط من الغشاء المخاطي للإحليل بحلقة جرثومية أو ملعقة فولكمان الخاصة. مع إفرازات طفيفة ، من الضروري القيام بتدليك أولي للإحليل. في النساء ، يتم أخذ المادة من مجرى البول ، والممرات المجاورة للإحليل ، وعنق الرحم ، والمستقيم ، ووفقًا للإشارات ، من البلعوم الفموي. أولاً ، يتم تنظيف المهبل من الإفرازات ، ويتم تدليك مجرى البول ، ويتم أخذ المادة عن طريق الكشط بحلقة جرثومية أو ملعقة فولكمان. يُفرك عنق الرحم أولاً بقطعة قطن معقمة لإزالة السدادة المخاطية. يتم إخراج التصريف من قناة عنق الرحم بواسطة حلقة أو ملاقط بكتريولوجية. يتم أخذ المادة من المستقيم البعيد باستخدام ملعقة فولكمان بالطريقة الأعمى ، أي بدون أي تحضير من قبل المريض ، أو بمساعدة منظار أو مرآة المستقيم. وفي هذه الحالة ، يتم أخذ المادة قيد الدراسة مباشرة من المرئي موقع الآفة: في السيلان الفموي البلعومي ، يتم أخذ المخاط من البلعوم مع مسحات قطنية معقمة على حوامل خاصة مصنوعة من الأسلاك الفولاذية. لتشخيص "الالتهاب ، تتم إزالة الملتحمة بحلقة جرثومية. نادرا ما يصاحب مرض السيلان تعقيدات السيلان والتهاب الشغاف والتهاب المفاصل. ثم يعمل الدم أو السائل الزليلي كمواد للاستخدام. مع الأخذ في الاعتبار المقاومة العالية للمكورات البنية ضد تقلبات درجة الحرارة ، يتم تسليم مواد الاختبار إلى المختبر في ترموسات خاصة أو أكياس بها وسادة تدفئة.فحص الجراثيم
الفحص الجرثومي هو الأكثر شيوعًا ، على الرغم من أنه طريقة أقل حساسية للتشخيص المختبري لمرض السيلان والسيلان مقارنة بعزل الثقافات الحقيقية. هذا ينطبق بشكل خاص على المسار المزمن للمرض ، عندما تحتوي مادة الاختبار على كمية صغيرة من المكورات البنية. ومع ذلك ، مع أخذ العينات الصحيحة ، والفحوصات المتكررة للمرضى ، واستخدام طرق الاستفزاز ، والتقييم المؤهل للطاخات ، فإن الفحص الجراثيم في كثير من الأحيان يجعل من الممكن تشخيص المرض بسرعة وبشكل صحيح. مادة الاختبار. أحدهما ملطخ بأزرق الميثيلين ، والثاني ملطخ بطريقة الجرام. في حالة عدم وجود الميثيلين الأزرق ، يمكن تلطيخ مسحة واحدة بمحلول مائي 1٪ من الكريستال البنفسجي أو محلول 0.5٪ من اللون الأخضر اللامع لمدة دقيقة واحدة. تم التوصل إلى الاستنتاج حول وجود المكورات البنية بناءً على خصائصها: اللون سالب الجرام ، التركيب المضاعف ، شكل حبوب البن ، الموقع داخل كريات الدم البيضاء. تحت تأثير المضادات الحيوية وأدوية العلاج الكيميائي الأخرى ، وكذلك في مرض السيلان المزمن ، فإن الشكل ولون المكورات البنية يمكن أن يتغير. تتخذ الخلايا الفردية شكلًا وحجمًا مختلفًا (ما يسمى بأشكال Asha). بالإضافة إلى ذلك ، يمكن العثور على المكورات سالبة الجرام المشابهة للمكورات البنية من جنس Veillonella في مادة الاختبار. هذا يحد إلى حد ما من القيمة التشخيصية لطريقة الفحص المجهري الأولية ، ويتم الحصول على أفضل النتائج وأكثرها موثوقية بطريقة التألق المناعي. مسحات رقيقة من إفرازات المرضى مثبتة في لهب الموقد. يتم تغطيتها بمصل مضاد للمكورات المعوية المسمى فلوريسئين لمدة ساعة عند 35 درجة مئوية في غرفة رطبة. بعد ذلك ، يتم غسل المسحات مرتين بمحلول عازل ، ويتم تخزينها بالجلسرين وتغطيتها بغطاء. عندما تتفاعل المكورات البنية مع الأجسام المضادة المسمى تحت المجهر الفلوري ، يظهر توهج مميز حول الخلايا البكتيرية.البحث البكتريولوجي
مؤشرات لعزل الثقافات النقية للمكورات البنية هي النتائج السلبية المتكررة للتنظير البكتيري ، ووجود المكورات البنية المشبوهة ، ولكن ليس الكائنات الحية الدقيقة المحددة شكليًا ، وكذلك من أجل إنشاء موثوق لعلاج المرض. من المهم جدًا وضع المحاصيل على الفور في منظم الحرارة. إذا كان من المستحيل إجراء محاصيل في مكان أخذ المادة ، فيمكنك تعليقها بقطعة قطن في أنبوب اختبار مع وسيلة نقل ستيوارت ، مما يضمن الحفاظ على صلاحية المكورات البنية أثناء التسليم إلى المختبر. المحاصيل هي تم إجراؤها وفقًا للمخطط القياسي في إحدى وسائط المغذيات الخاصة في أنابيب الاختبار أو أطباق بتري (KDS أو Bailey أو أجار الدم أو المصل ، وسيط المغذيات الجافة لمؤسسة Kharkov "Biolek" لإنتاج البكتيرية و الأدوية ). لتشخيص زراعة المكورات البنية في العديد من البلدان ، يتم استخدام آجار "الشوكولاتة" أيضًا. أفضل وسائل الإعلام المصنوعة على أساس أجار من لحم الأرانب أو قلوب الأبقار الطازجة. إن إضافة 20 وحدة / مل من البوليميكسين و 2 ميكروغرام / مل من لينكومايسين إليها يزيد بشكل كبير من وتيرة بذر المكورات البنية ، لأن هذه الأدوية تمنع نمو البكتيريا الأخرى. يتم تسخين جميع الوسائط قبل البذر في منظم الحرارة لمدة 15-20 دقيقة. يتم وضع الأكواب والأنابيب المزودة بمزارع في مجففات ، حيث يتم تكوين جو يحتوي على 20٪ من ثاني أكسيد الكربون. تنمو المستعمرات عادة في غضون 18-24 ساعة ، ولكن النمو المتأخر ممكن أيضًا. ثم يتم الاحتفاظ بالمحاصيل في منظم حرارة (في مجفف!) لمدة تصل إلى 8 أيام ، مع التحقق من مظهر النمو يوميًا. مستعمرات المكورات البنية التي نمت لها شكل دائري محدب قليلاً وحواف ناعمة وسطح لامع واتساق مخاطي . فهي شفافة ، مثل قطرات الندى ، عديمة اللون تقريبًا ، على الرغم من إمكانية ظهور المتغيرات البيضاء أيضًا. يتم فحص المستعمرات الناتجة بشكل كبير ومجهري. في المسحات ، توجد المكورات البنية في أزواج ورباعية وعناقيد. يتم طلاء المستعمرات التمثيلية على مائل أجار مصل لعزل ثقافة نقية. يتم إجراء التحديد النهائي مع الأخذ في الاعتبار الخصائص المورفولوجية والثقافية والإنزيمية والمستضدية. من الناحية الكيميائية الحيوية ، المكورات البنية ليست نشطة للغاية. على وسط مصل يحتوي على 1.5٪ من الكربوهيدرات المختلفة ، يتحللون الجلوكوز فقط ، ولكن ليس المالتوز والسكروز. يتم تحديد نشاط أوكسيديز في الثقافات المعزولة عن طريق تطبيق محلول 1٪ من ثنائي ميثيل بارافينيلين ديامين على المستعمرات (بعد الفحص المجهري). تتحول المستعمرات الموجبة للأوكسيديز أولاً إلى اللون الأحمر ثم تتحول إلى اللون الأسود ، كما أن تمييز المكورات البنية عن الأنواع الأخرى من جنس النيسرية له أهمية خاصة في تشخيص السيلان الفموي البلعومي. كما تعلم ، يوجد باستمرار عدد كبير من النيسرية سالبة الجرام على الغشاء المخاطي في اللوزتين والبلعوم الأنفي والبلعوم الأنفي - ممثلو البكتيريا البشرية الطبيعية. الطرق الموثوقة لتحديد المكورات البنية هي اختبارات التألق المناعي واللاتكس والتلصيق ، وكذلك تحديد الخصائص الأنزيمية. تأكد من إجراء تحديد نوعي لحساسية أو مقاومة الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية باستخدام طريقة انتشار الأجار باستخدام الأقراص. من أجل زيادة تواتر العثور على المكورات البنية في المسحات أثناء الفحص المجهري الأولي وعزل أكثر موثوقية للمزارع النقية ، خاصة في حالات المسار البطيء والمزمن للمرض ، يتم اللجوء إلى طرق استفزاز السيلان ، أي تفاقم مصطنع للعملية المرضية ، ونتيجة لذلك يظهر عدد أكبر من المكورات البنية في الإفرازات. أهم هذه الطرق هي: أ) تقطير كيميائي في مجرى البول لمحلول 0.5 ٪ من نترات الفضة لدى الرجال ، وتزييت قناة عنق الرحم بمحلول 2-5 ٪ من نترات الفضة ؛ ب) ميكانيكي - إدخال مباشر bougie في مجرى البول لمدة 10 دقائق ، أو إجراء تنظير الحالب الأمامي ؛ ج) إعطاء بيولوجي - عضلي من gonovaccine بكمية 500 مليون جسم جرثومي أو 200 MPD ؛ د) غذائي - استهلاك الطعام المالح والحار ؛ الحيض. من الأفضل الجمع بين عدة طرق للاستفزاز ، على سبيل المثال ، الكيميائية والغذائية والبيولوجية.في الآونة الأخيرة ، تم أخذ تفاعل البلمرة المتسلسل لتحديد العامل المسبب لمرض السيلان بشكل أكثر موثوقية. يسمح لك بتحديد العوامل الممرضة في حالات السيلان المزمن ، عندما لا يعطي الفحص الجرثومي والبكتريولوجي نتائج إيجابية.التشخيص المصلي
يتم إجراء التشخيص المصلي لمرض السيلان بشكل نادر نسبيًا ، خاصة في مساره المزمن ، عندما لا تعطي الدراسات البكتيرية والبكتريولوجية نتائج إيجابية. في الظروف الحديثة ، يتم إجراء مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم ، وتفاعلات RNGA و Borde-Jangu (RSK). المستضدات لهذه التفاعلات هي: لقاح المكورات البنية المتعددة التكافؤ المميت بالحرارة ، اللقاح المعطل بالموجات فوق الصوتية ، جزيئات البروتين والسكاريد من المكورات البنية ، ومستضد بيريدين. ELISA و RNHA هي اختبارات مصلية محددة للغاية وموثوقة. مقارنة بالماضي ، فقد RSK دوره إلى حد ما. ليس له أي قيمة عملية في تشخيص مرض السيلان الحاد ، حيث يتم علاجه قبل تكوين كمية كبيرة من الأجسام المضادة. لإثبات موثوقية العلاج ، فإنه غير مناسب بشكل عام. يعتبر تفاعل Borde-Jangu مهمًا في التشخيص المصلي لمرض السيلان المزمن ، خاصةً في أشكاله المعقدة (تعفن السيلان ، والتهاب الميثيل ، والتهاب المفاصل البروستاتي ، وما إلى ذلك). تم تقليل القيمة التشخيصية لاختبارات الحساسية إلى حد ما بسبب حقيقة أنها إيجابية لسنوات عديدة بعد اصابته بمرض السيلان. لإنتاجها ، يتم حقن 0.1 مل من لقاح المكورات البنية الطازجة (100 مليون خلية ميكروبية في 1 مل) داخل الأدمة. بعد 24 ساعة ، لوحظ احتقان ، وأحيانًا مع وذمة في المركز.العلاج والوقاية
في العلاج الكيميائي لمرض السيلان ، يتم استخدام المضادات الحيوية: بيتا لاكتام (البنسلين ، السيفالوسبورينات) والمضادات الحيوية الأخرى. لا يتم التطعيم ضد مرض السيلان بسبب عدم وجود لقاحات فعالة. للوقاية من مرض السيلان ، يتم غرس جميع الأطفال حديثي الولادة بمحلول من أحد المضادات الحيوية المدرجة على ملتحمة العين.تستخدم الطرق المخبرية على نطاق واسع في تشخيص الأمراض المنقولة جنسياً للجهاز البولي التناسلي: السيلان ، الزهري ، داء المشعرات ، إلخ. يتطلب وجود المرض تدابير لتحديد سبب العدوى.
الوسيط الغذائي "SVG" مخصص لعزل وزراعة المكورات البنية في دراسة المواد من المريض. تم تصميم كل مجموعة لتحضير 110 مل من وسط المكورات البنية الجاهزة للاستخدام.
ضبط التكوين
يجب تخزين مجموعة للحصول على وسط غذائي عند درجة حرارة 2-8 درجة مئوية لمدة لا تزيد عن 12 شهرًا. يمكن تخزين المواد الغذائية الصلبة في أنابيب الاختبار أو أطباق بتري لمدة لا تزيد عن 7 أيام. تشتمل مجموعة تحضير الوسط الغذائي على:
- القاعدة: أجار ، مستخلص الخميرة ، الببتون ، النشا ، الأملاح.
- مادة مضافة انتقائية: الإنزيمات المساعدة ، محللة كرات الدم الحمراء ، مضادات الفطريات ، المضادات الحيوية ، السكريات.
- تعليمات لاستخدام المجموعة.
المنهجية
تتضمن المنهجية عدة مراحل ، يجب تنفيذ كل منها وفقًا لمتطلبات معينة. عند الانتهاء من جميع مراحل تشخيص المرض باستخدام طريقة زراعة العامل الممرض على وسط المكورات البنية ، يتم تسجيل النتائج بعد 24 ساعة و 48 ساعة و 72 ساعة. في مرض السيلان الحاد ، لوحظ نمو المكورات البنية خلال اليوم الأول ، في مرض السيلان المزمن - حتى 72 ساعة.
يتم تحضير المحلول الأساسي للوسيط للتشخيص الثقافي عن طريق صب القاعدة في وعاء يحتوي على ماء مقطر (100 مل) للتورم اللاحق. يتم وضع المعلق الناتج في حمام مائي وتقليب بشكل دوري حتى تذوب القاعدة تمامًا ، ثم يغلي المحلول لمدة دقيقتين. يتم تحضير محلول من مادة مضافة انتقائية بإذابة في ماء مقطر (10 مل) مع التحريك.
يتم تشكيل وسط المغذيات الجاهز عن طريق إضافة محلول مضاف انتقائي إلى محلول القاعدة. يتم سكب الوسط الناتج في أطباق بتري المعقمة. قبل الاختبار ، يجب الحفاظ على بيئة المكورات البنية لمدة ساعة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. ثم يتم زرع المادة وفقًا لأمر وزارة الصحة "بشأن توحيد طرق البحث الميكروبيولوجية (البكتريولوجية) المستخدمة في مختبرات التشخيص الإكلينيكي للمؤسسات الطبية".
Neisseria gonorrhoeae هو عضو في عائلة Neisseriaceae ، جنس Neisseria. تم اكتشاف Gonococci بواسطة Neisser في عام 1879 وتم تسمية العائلة بأكملها باسمه.
علم التشكل المورفولوجيا. Gonococci هي مكورات ثنائية تتكون من نوعين من المكورات على شكل حبة البقول ملقاة بجوانب مقعرة لبعضهما البعض (تذكرنا بحبوب البن). حجم المكورات البنية هو 1.2-1.3 × 0.7-0.8 ميكرومتر. إنها متعددة الأشكال ؛ إلى جانب البكتيريا الكبيرة ، توجد بكتيريا صغيرة جدًا غير منتظمة الشكل على شكل حرف L. المكورات البنية غير متحركة وليس بها جراثيم. توجد مادة تشبه الكبسولة في المادة المرضية (القيح). الجرام سالب. تحت تأثير الأدوية وغيرها من المواد ، فإنها تتغير بسرعة: تظهر أشكال إيجابية الجرام. في المادة المرضية ، توجد داخل الخلايا (في الكريات البيض) ، ولكن قد تكون خارج الخلية. قد يكون في شكل مكورات فردية (انظر الشكل 4).
زراعة. المكورات البنية هي أيروب. متطلبة للغاية على وسائط المغذيات. تنمو على وسائط تحتوي على بروتين أصلي (بشري) - دم ، مصل ، عند درجة حرارة 37 درجة مئوية ودرجة حموضة 7.2-7.4. يجب أن تكون الوسائط طازجة ورطبة. يجب أن يتم البذر مباشرة بعد أخذ المادة. على وسط المصل ، تشكل المكورات البنية مستعمرات صغيرة 1-2 مم ، شفافة ، لامعة مع حواف ناعمة ، تشبه قطرات الندى. على وسط الدم ، لا يتم إعطاء انحلال الدم. في مرق مصل اللبن ، فإنها تعطي تعكرًا طفيفًا وطبقة تستقر في قاع الأنبوب. مع ضعف النمو بعد 24 ساعة ، تُترك المحاصيل في منظم الحرارة لليوم الثاني.
الخصائص الأنزيمية. يتم التعبير عن الخصائص المحللة للسكريات بشكل ضعيف. تكسر Gonococci سكرًا واحدًا فقط - الجلوكوز بتكوين الحمض. ليس لديهم خصائص الحالة للبروتين.
تكوين السم. يوجد في جدار خلية المكورات البنية مادة سامة - عديدات السكاريد الدهنية (تمت دراستها قليلاً).
هيكل مستضد. التركيب المستضدي غير متجانس ويتغير بسهولة تحت تأثير العوامل البيئية. لا يوجد تقسيم مقبول بشكل عام للمكورات البنية إلى أنماط مصلية وأنماط مصلية حتى الآن.
المرونة في التعامل مع العوامل بيئة . في البيئة الخارجية ، المكورات البنية ليست مستقرة جدًا. عند درجة حرارة 56-60 درجة مئوية ، يموتون. عند درجة حرارة 40 درجة مئوية ، تقل صلاحيتها بشكل حاد. درجات الحرارة المنخفضة والجفاف تدمرها بسرعة. لكنها تستمر في القيح لمدة تصل إلى 24 ساعة. محاليل مطهرة- محلول 1٪ من الفينول ، حامض 1: 1000 يقتل المكورات البنية في غضون دقائق قليلة. تعتبر Gonococci حساسة بشكل خاص لأملاح الفضة - فمحلول 1 ٪ من نترات الفضة يدمرها على الفور. تقتلهم الأشعة فوق البنفسجية في غضون دقائق.
حساسية الحيوان. الحيوانات ليست عرضة للإصابة بالمكورات البنية. ومع ذلك ، فإن إعطاء سموم المكورات البنية داخل الصفاق للفئران البيضاء يؤدي إلى موتها.
مصادر العدوى. شخص مصاب بمرض السيلان.
طرق النقل. الاتصال بالمنزل (الجنسي) ، في كثير من الأحيان من خلال الأشياء الملوثة (منشفة ، إسفنج ، إلخ).
أمراض البشر. السيلان والاسفنج.
طريقة تطور المرض. المضيف الطبيعي للمكورات البنية هو شخص مريض. تخترق المكورات البنية الأغشية المخاطية للإحليل (عند النساء - الإحليل وعنق الرحم). عامل الإمراضية للمكورات البنية هو وجود الشعيرات الدموية فيها ، والتي ترتبط بالميكروفيلي للظهارة الأسطوانية ، وتساهم في تغلغل المكورات البنية في الخلية الظهارية ، مما يتسبب في حدوث عملية التهابية حادة في الغشاء المخاطي.
سريريًا ، يتجلى السيلان في الألم أثناء التبول ، وإفراز القيح من مجرى البول والمهبل. المرض حاد ، لكنه أحيانًا يصبح مزمنًا. يمكن أن تسبب المكورات البنية التهاب الملتحمة السيلاني - السيلان البيني (التهاب صديدي في الغشاء المخاطي للعين عند الأطفال حديثي الولادة). نادرًا ما تنتشر المكورات البنية من مجرى البول إلى الأعضاء الأخرى ، ولكنها في بعض الأحيان يمكن أن تسبب التهاب المفاصل والتهاب الشغاف وما إلى ذلك.
حصانة. لا توجد مقاومة طبيعية للمكورات البنية. المرض المنقول أيضا لا يخلق مناعة. البلعمة المرصودة غير مكتملة.
وقاية. التثقيف الصحي. رفع المستوى الثقافي والصحي. لا يوجد منع محدد. للوقاية من مرض السيلان ، يجب حقن الأطفال بعد الولادة مباشرة في كيس الملتحمة 1-2 قطرات من محلول 30٪ من البوسيد.
علاج. المضادات الحيوية (البنسلين ، البيسيلين ، الستربتومايسين ، إلخ). كما تستخدم أدوية السلفا. في الشكل المزمن ، يتم استخدام لقاح المكورات البنية.
أسئلة التحكم
1. وصف الخصائص المورفولوجية للمكورات البنية.
2. ما هو النشاط الأنزيمي والتكوين السمي للمكورات البنية؟
3. ما هي مقاومة المكورات البنية. ما هو دواء المكورات البنية الحساسة بشكل خاص؟
4. ما هي الأمراض التي تسببها المكورات البنية ومرضها.
البحوث الميكروبيولوجية
الغرض من الدراسة: الكشف عن المكورات البنية والأجسام المضادة للمكورات البنية.
مواد بحثية
1. انفصال الغشاء المخاطي للإحليل عند الرجال.
2. إفرازات الغشاء المخاطي للإحليل وعنق الرحم عند النساء.
3. إفرازات قيحية من العين.
4. الدم للحصول على المصل.
ملحوظة. للفحص الجرثومي والبكتريولوجي ، يتم أخذ المادة: 1) قبل بدء العلاج بالمضادات الحيوية: 2) في موعد لا يتجاوز 10 أيام بعد انتهاء العلاج بالمضادات الحيوية ؛ 3) في موعد لا يتجاوز ساعتين بعد التبول الأخير ؛ 4) في موعد لا يتجاوز ساعتين بعد الغسل.
طرق البحث الأساسية
1. مجهري (يستخدم بشكل رئيسي في الأشكال الحادة).
2. علم الأحياء الدقيقة.
3. المصلي.
تقدم البحث
اليوم الثاني من البحث
أخرج المحاصيل من منظم الحرارة واعرضها. دراسة المستعمرات. يصنعون اللطاخات. في حالة وجود مكورات ثنائية سالبة الجرام مشبوهة ، تتم زراعة المستعمرات على وسط مائل في أنابيب الاختبار (يجب تحضير الوسط حديثًا ويحتوي على كمية كافية من المكثفات) ويتم أخذ عينة من أوكسيديز. للقيام بذلك ، يتم تطبيق قطرة 1 ٪ من محلول ثنائي ميثيل بارافينيلين ديامين على المستعمرة باستخدام ماصة ، وتغير المستعمرات لونها من البني الداكن إلى الأسود.
اليوم الثالث من البحث
يتم إخراج المزارع من منظم الحرارة ، ويتم أخذ المسحات من مائل الأجار ، وملطخة بالجرام ويتم فحصها بالميكروسكوب. يتم تلقيحها على وسط Hiss (اللاكتوز والجلوكوز والمانيتول والمالتوز). يجب أن تحتوي هذه الكربوهيدرات على 30٪ من مصل الدم. يتم وضع الأنابيب الملقحة في منظم الحرارة.
اليوم الرابع من البحث
قم بإزالة أنابيب الاختبار من منظم الحرارة ، وفي حالة عدم وجود نمو ، اتركها في منظم الحرارة لمدة 1-2 أيام أخرى. في ظل وجود نمو ، تؤخذ النتائج في الاعتبار (الجدول 28).
التشخيص المصلي
الأسبوع الثالث من المرض. في المسار المزمن للمرض وفي الحالات المشكوك فيها ، يتم وضع RSK مع مصل المريض (انظر الفصل 12). كمستضد ، يتم استخدام مزرعة المكورات البنية المقتولة ، والتي يتم تحضيرها في ظل الظروف الصناعية. يمكنك تطبيق تفاعل التراص الدموي غير المباشر (انظر الفصل 12).
أسئلة التحكم
1. ما هي المادة المستخدمة للكشف عن المكورات البنية وكيف يتم الحصول عليها؟
2. كم من الوقت بعد التبول (أو الغسل عند النساء) يمكن أخذ المواد للبحث؟
3. ما هي طريقة البحث الرئيسية لمرض السيلان الحاد وما هي طريقة علاج السيلان المزمن؟
4. متى وما هو نوع التفاعل المصلي الذي يُعطى لمرض السيلان المشتبه به؟
5. ما هي الكائنات الحية الدقيقة اللازمة للتمييز بين المكورات البنية؟
احصل على الدواء من المعلم. افحصها وارسم المكورات البنية الموجودة داخل وخارج الكريات البيض على صبغة جرام.
بيئة محفزة. أضف إلى 100 مل من MPA من لحم الأرانب 15 مل من صفار البيض (بيض الدجاج الطازج) ، 6 مل من مؤشر الفينول الأحمر ، 1.5 مل من السكر المذاب في 1 مل من الماء المقطر المعقم.
استسقاء أجار متوسط المغذيات. يتم إضافة 2٪ أجار ، 1٪ ببتون و 0.5٪ كلوريد صوديوم إلى ترشيح المرق المحضر من لحم الأرانب. تسخين حتى يذوب الآجار ، واضبط درجة الحموضة على 7.4-7.5 ، قلونة مع 20٪ هيدروكسيد الصوديوم. يتم إحضار الوسط إلى الغليان ، وتصفيته ، وصبه في قوارير معقمة وتعقيمه في الأوتوكلاف لمدة 15 دقيقة عند 115 درجة مئوية.
وصفات الوسائط الاستسقائية (MPA pH 7.4-7.5).
1) ماء اللحم من لحم الأرانب أو قلوب الثور - 100 مل
تحلل الكازين - 2 مل
الخميرة ذاتية التحلل - 2 مل
مصل دم الماشية - 20 مل
2) ماء اللحم من لحم الأرانب أو قلوب الثور - 100 مل
محلول 5 ٪ من هيدروليزات - 2 مل
الخميرة ذاتية التحلل - 2 مل
مصل بقري - 20 مل
3) ماء اللحم من لحم الأرانب أو قلوب الثور - 100 مل
صفار بيض الدجاج - 10 مل
مصل دم الماشية - 20 مل
نمو المكورات البنية على هذه الوسائط وفير. يمكن الكشف عن مستعمرات المكورات البنية عن طريق اختبار أوكسيديز ، والذي يتحول إلى اللون الأحمر إلى الأسود.
يوصى باستخدام هذا الأجار المضاف إليه الدم أو الهيموجلوبين أو أي مواد مضافة أخرى للعزل الانتقائي للمكورات البنية.
مُجَمَّع**:
** يتم التحقق من التكوين وتقديمه إلى الامتثال للمعايير الضرورية
طبخ:
علق 7.2 جرام من المسحوق في 100 مل من الماء المقطر لتحضير وسط مزدوج القوة. سخنيها حتى الغليان حتى تذوب الجزيئات تمامًا. تعقيم بالبخار المضغوط عند 1.1 ضغط جوي (121 درجة مئوية) لمدة 15 دقيقة. بارد إلى 50 درجة مئوية وأضف بطريقة معقمة 100 مل من محلول الهيموجلوبين المعقم 2 ٪ (FD022) ومكمل GC (FD021) معقمًا بشكل منفصل. تخلط جيدا وتصب في أطباق بتري. لنقل خصائص انتقائية إلى الوسط ، يمكنك إضافة المضادات الحيوية المدرجة في الإضافات التالية: VNC (FD023) ، VCNT (FD024) ، لينكو T (FD026) ، فانكو (FD028).
لتحضير أجار الشوكولاتة ، يتم تحضير وسط تركيز قياسي بخلط 3.6 جم من المسحوق في 100 مل من الماء المقطر. تعقيم ، أضف ما يصل إلى 5٪ (حجم / حجم) من الدم المعقم منزوع الألياف ، وقم بتسخين الوسط عند 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
مبدأ النتيجة وتقييمها:
يوصى باستخدام هذا الأجار المضاف إليه الدم أو الهيموجلوبين والإضافات الأخرى للعزل الانتقائي وزراعة الكائنات الدقيقة الحساسة مثل المكورات البنية والمستدمية النزلية. طور جونستون آجار الشوكولاتة الذي يمكن أن ينمو في غضون 24 ساعة. النيسرية البنية(1). في وقت لاحق ، قام مؤلفون آخرون (2) بتحسين الوسط عن طريق إدخال الهيموجلوبين في تركيبته.
يحتوي Agar على ببتون خاص - مصدر للعناصر الغذائية للكائنات الحية الدقيقة. النشا يحيد المواد السامة التي تشكلها النيسرية ، والفوسفات يقاوم تحول الأس الهيدروجيني الناتج عن تكوين الأمينات ، والتي يمكن أن تؤثر أيضًا على نمو الكائنات الحية الدقيقة وحيويتها. يعمل الهيموغلوبين كمصدر للعامل X لبكتيريا الهيموفيليا. مادة مضافة أخرى تثري الوسط بالعامل الخامس (NAD ، nikoninamide adenine dinucleotide) ، الضروري للمستدمية النزلية ، وكذلك الأحماض الأمينية ، والفيتامينات ، وأيونات الحديد ، وما إلى ذلك ، مما يحفز نمو النيسرية المسببة للأمراض.
لا تستخدم أعواد قطنية لتجميع المواد. يتم البذر مباشرة بعد اختيار المادة. يجب أن يتم ذلك حتى توجد مناطق نمو كثيفة ونادرة. يتم تحضين البذر عند 37 درجة مئوية في جو من 5-10٪ ثاني أكسيد الكربون و 70٪ رطوبة. يجب فحص جميع المستعمرات المشبوهة في الاختبارات البيوكيميائية و / أو المصلية.
رقابة جودة:
مظهر المسحوق:
مسحوق أصفر فاتح متدفق حر متجانس.
كثافة متوسطة منتهية:
يتم تكوين وسيط يتوافق مع كثافة جل أجار 1.0٪.
لون وشفافية الوسيط النهائي:
قاعدة الوسط صفراء فاتحة أو شفافة أو براق قليلاً. بعد إضافة الهيموجلوبين ، يتحول الوسط إلى لون الشوكولاتة البني وغير شفاف إذا تشكل الهلام في أطباق بتري.
حموضة البيئة:
عند 25 درجة مئوية ، يكون للمحلول المائي (3.6٪ وزن / حجم) أس هيدروجيني 7.2 ± 0.2.
الخصائص الثقافية:
خصائص نمو السلالة المرجعية بعد 40-48 ساعة عند 35-37 درجة مئوية على أجار الشوكولاتة المحضر على هذا الأساس ، في وجود 5-10٪ ثاني أكسيد الكربون و 70٪ رطوبة في الغلاف الجوي.
